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為什么大多數(shù)的細(xì)胞培養(yǎng)需要用二氧化碳培養(yǎng)箱來操作
細(xì)胞培養(yǎng)(cell culture)技術(shù)是指選用各種細(xì)胞的生存條件對活細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)和研究的技術(shù),是廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)領(lǐng)域的重要技術(shù)。
二氧化碳培養(yǎng)箱主要通過模擬生物體的溫度,濕度,PH值等進(jìn)行生物細(xì)胞的培養(yǎng),是實(shí)驗(yàn)室做細(xì)胞培養(yǎng)*的一款培養(yǎng)箱。
一般細(xì)胞培養(yǎng)液的pH在7.0-7.4之間。由于碳酸鹽pH緩沖系統(tǒng)是一種pH緩沖系統(tǒng)(它是人體血液中重要的pH緩沖系統(tǒng)),大多數(shù)培養(yǎng)液用它來保持穩(wěn)定的pH。用粉末配制培養(yǎng)液時(shí),常常需要加入一定量的碳酸氫鈉。
對大多數(shù)以碳酸鹽作為pH緩沖系統(tǒng)的培養(yǎng)液而言,為了維持穩(wěn)定的pH,培養(yǎng)箱中的二氧化碳需要維持在2-10%之間,以保持培養(yǎng)液中溶解的二氧化碳的濃度。同時(shí)細(xì)胞培養(yǎng)的器皿需要一定程度的透氣,以便于氣體的交換。
是不是采用其他pH緩沖系統(tǒng)就不需要二氧化碳培養(yǎng)箱了呢?人們發(fā)現(xiàn)由于空氣中的二氧化碳濃度很低,如果細(xì)胞不在二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng),培養(yǎng)液中的HCO3-會(huì)被耗盡,這樣會(huì)影響細(xì)胞的正常生長。所以大部分動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng),還是需要二氧化碳培養(yǎng)箱。
細(xì)胞培養(yǎng)液中常附加其他的pH緩沖系統(tǒng),比如HEPES緩沖系統(tǒng),來增加pH緩沖能力。HEPES在pH7.2-7.4之間有很強(qiáng)的緩沖能力,當(dāng)透氣的培養(yǎng)器皿被拿到二氧化碳培養(yǎng)箱外面的時(shí)候,由于空氣中二氧化碳濃度很低,培養(yǎng)液中碳酸鹽緩沖系統(tǒng)就會(huì)失去效果,這時(shí)候HEPES緩沖系統(tǒng)就能繼續(xù)保持pH的穩(wěn)定。